mais a conformação do FL do que propriamente sua carga⁽²⁵⁾. A ELISA utilizada para detecção de aCL (IgG, IgM, IgA) está padronizada desde a realização do primeiro simpósio em AAF, realizado em 1987⁽²⁶⁾. Pacientes com níveis moderados ou altos de aCL, especialmente IgG e IgM, estão propensos a eventos trombóticos^(22,26). De forma eventual, IgA aCL pode ser detectada isoladamente em pacientes com SAF⁽²⁶⁾. Nos pacientes que cursam com fator reumatóide IgM em títulos altos no soro, falsa-positividade para IgG ou IgM aCL pode ser observada em ELISA⁽²⁷⁾. Nesta circunstância, a absorção do fator reumatóide com anti-soros deve ser efetuada⁽²⁷⁾. A avidez dos anticorpos pela CL em placas de ELISA é consideravelmente maior quando são usados diluentes que utilizam soro bovino a 10%, fonte de beta-2-glicoproteína 1 (beta-2-gp1)^(1,28). É possível que a conformação bioquímica da CL seja modificada na presença da beta-2-gp1, ou que os dois compostos formem um complexo antigênico, ou ainda que a beta-2-gp1 funcione como antígeno isoladamente⁽²⁸⁾. A beta2-gp1 (ou apoliproteína H) é um anticoagulante natural, com ações inibitórias na ativação do fator XII(29). Além do mais, parece inativar o complexo ativador da protrombina ao interagir com FL de carga negativa⁽²⁹⁾. Os efeitos da beta-2-gp1 sobre a cascata da coagulação são aparentemente desregulados por AAF, o que resultaria em tromboses^(28,29). Anticorpos anti-beta-2-gp1 podem ser detectados através de ELISA, e podem servir de marcadores de SAF concomitantemente ou não a outros AAF como AL e aCL^(30,31). De interesse, o soro de pacientes com infecções como sífilis ou tuberculose não costuma conter anticorpos que reajam contra beta2-gp1⁽³²⁾; este achado é importante na diferenciação das especificidades dos AAF em infecções e na SAF⁽³²⁾. Em um estudo datado de 1992, anticorpos anti-beta-2-gp1 estiveram mais convincentemente associados a tromboses do que outros AAF em pacientes com LES⁽³³⁾. De acordo com outro grupo de autores, não mais do que 50% dos pacientes aCL-positivos com SAF foram positivos para anticorpos anti-beta-2-gp1⁽³⁴⁾. Claramente, há subgrupos de pacientes com SAF com anticorpos que reagem contra um composto mas não contra o outro^{(33,34). Embora uma similaridade estrutural entre a beta-2-gp1 e a lipoproteína LDL (low density lipoprotein) tenha sido previamente descrita(35), a eventual existência de anticorpos cruzados contra as duas moléculas não pôde ser comprovada em pacientes com SAF(34). Interessantemente, um grupo de autores havia anteriormente relatado reação cruzada entre aCL e anticorpos anti- LDL em pacientes com LES(36).}

Os testes sorológicos para sífilis foram as primeiros a utilizarem FL como reagentes^(1,37,38). Tanto na reação de floculação do VDRL (Venereal Disease Research Laboratory), como no teste de fixação de Complemento (ensaio de Wasserman), a mistura antigênica inclui CL, FC e colesterol^(37,38). Embora o VDRL falso-positivo ainda se constitua em critério laboratorial para LES⁽³⁹⁾, o teste é pouco sensível para o diagnóstico de SAF^(3,37). Enquanto os anticorpos de pacientes com sífilis são ávidos pela mistura CL-FC-colesterol, na SAF a avidez dos anticorpos é consideravelmente menor, gerando baixas titulações (falsa-positividade) no VDRL⁽³⁷⁾. O VDRL foi utilizado em ELISA por dois grupos de autores^(37,38), e nestas circunstâncias ficaram evidentes os achados previamente observados no teste de floculação: soros sifilíticos reagem fortemente ao VDRL em placas de ELISA, enquanto anticorpos obtidos de pacientes com SAF o fazem fracamente. Postula-se que a FC e o colesterol funcionem como "lípides auxiliares", moldando a conformação da CL e em conseqüência a sua antigenicidade frente aos anticorpos de pacientes com sífilis ou SAF^(37,38). Na SAF, as especificidades antigênicas do AL e do aCL, contrariamente aos estudos iniciais que mostravam boa correlação entre os dois testes^(2,3,39), parecem, de fato, diferir⁽⁴⁰⁾. A discordância entre os dois testes pode chegar a 35% dos casos⁽⁴¹⁾. Em 1989, descrevemos sete pacientes com SAF nos quais a positividade para AL não foi acompanhada por reatividade contra FL de carga negativa em ELISA⁽⁴²⁾. Derksen e cols. observaram diferentes efeitos da prednisona no AL e no aCL, o primeiro sendo rapidamente removido da circulação, enquanto aCL se comportavam de maneira mais "rígida"⁽⁴³⁾. O mesmo autor sugeriu, em 1988, que o AL é um teste mais específico (embora menos sensível) do que aCL em pacientes com SAF⁽⁴⁴⁾. De fato, em pacientes com LES, independente dos níveis séricos do anticorpo, aCL são detectados em cerca de 40% dos casos⁽³⁾, enquanto o AL pode ser encontrado em 10% dos pacientes⁽⁴⁵⁾. A SAF parece acometer aproximadamente 5% dos pacientes com LES⁽⁴⁶⁾. Neste contexto, novamente o AL parece provido de maior especificidade em relação aos aCL no diagnóstico de SAF^(45,46). McNeil e cols., em 1989, já sugeriam que aCL e AL compreendem dois subgrupos de AAF com diferentes reatividades; neste intrigante estudo, aCL e anticorpos com propriedades de AL puderam ser purificados separadamente do plasma de pacientes com SAF⁽⁴⁷⁾. Outros pequisadores sugerem que o AL se acopla a um complexo que inclui FL de carga negativa e protrombina, enquanto os alvos seletivos dos aCL são FL de carga negativa⁽⁴⁸⁾.